Sistema de Medición de Fluorescencia de Plastocianina, Ferredoxina y Clorofila DUAL-KLAS-NIR

Suministros de laboratorio Kasalab le ofrece Sistema de Medición de Fluorescencia de Plastocianina, Ferredoxina y Clorofila DUAL-KLAS-NIR entre su amplia gama de equipos para laboratorio para la venta en Colombia.

Introducción

El DUAL-KLAS-NIR mejora al DUAL-PAM-100 al usar cuatro pares de longitudes de onda NIR, lo que permite distinguir con precisión los cambios redox de plastocianina (PC), P700 y ferredoxina (Fd). Obtiene sus espectros in vivo, permitiendo monitorear en tiempo real estos componentes y calcular relaciones como PC/P700 y Fd/P700.

También funciona como fluorómetro PAM, pudiendo excitar con luz verde o azul, donde la luz verde permite analizar capas más profundas y compararlas mejor con las señales NIR.
El software es similar al del DUAL-PAM-100, lo que facilita su uso, y ofrece rutinas automatizadas para ejecutar protocolos complejos con facilidad.

Características destacadas del Sistema de Medición de Fluorescencia de Plastocianina, Ferredoxina y Clorofila DUAL-KLAS-NIR

• Único equipo capaz de separar en tiempo real las señales NIR de P700, PC y Fd.
• Permite estimar proporciones y tamaños de depósito entre P700/PC y P700/Fd.
• Mide simultáneamente fluorescencia y estados redox, caracterizando toda la cadena de transporte electrónico en una sola medición.
• Funciona en modos de 1, 2 o 6 canales con resoluciones de 35 µs, 150 µs y 1 ms.
• Utiliza una técnica de modulación por bloques de 50 µs adaptada del DUAL-PAM-100.
• Emplea luz de medición verde para coincidir con absorbancia y un canal azul con señal más intensa y diferenciación haz/envés.
• Incluye LEDs actínicos rojos, azules y rojos lejanos para iluminación continua y pulsos.
• Mide en cuatro pares NIR: 785–820, 820–870, 870–950 y 840–950 nm.
• Permite iluminación por ambos lados de la hoja para mayor homogeneidad.
• Rango amplio de frecuencias de medición (1 Hz a 400 kHz) para F₀ y cinéticas ultrarrápidas.
• Todas las fuentes de luz pueden conmutarse en 2,5 µs.
• Incluye scripts para mediciones consecutivas de alta resolución.
• Cuenta con funciones como cinética lenta automatizada, ejecuciones activadas, promedio en línea/offline y rutinas automatizadas de medición.

Espectros de modelos diferenciales (DMP) para la deconvolución de las señales NIR

Los espectros NIR de P700, PC y Fd son amplios y difíciles de separar, además de tener coeficientes de extinción muy distintos. Usando pares de longitudes de onda específicos se pueden obtener señales enriquecidas en cada componente, pero no completamente limpias.

Para resolver esto, el sistema emplea el método DMP (gráfico de modelo diferencial), que permite deconvolucionar sin conocer espectros diferenciales exactos. Con experimentos diseñados para aislar temporalmente los cambios redox de cada componente, el software obtiene una huella espectral propia de P700, PC y Fd. También se reconoce que los centros FA y FB del fotosistema I pueden contribuir parcialmente a la señal atribuida a Fd.

Solicitudes para el DUAL-KLAS-NIR

El DUAL-KLAS-NIR es único en su clase, ya que proporciona señales deconvolucionadas en línea de los estados redox in vivo de P700, PC y Fd en tiempo real. Esto abre un campo de investigación completamente nuevo con aplicaciones que quizás no se nos hayan ocurrido todavía. En particular, por primera vez se puede obtener información cinética simultánea sobre la compleja interacción entre las reacciones en los lados donante y aceptor de PS I, incluida información sobre el transporte cíclico de electrones alrededor de PS I.

• Rendimiento cuántico efectivo del fotosistema I.

En todas las mediciones anteriores, la señal P700 contenía siempre contribuciones de Fd y cantidades variables de PC, dependiendo del método utilizado para reducir esta contribución. El panel C de la figura ilustra la dependencia de la intensidad de la luz del rendimiento cuántico efectivo de PSI Y(I), el rendimiento cuántico efectivo de PSII Y(II) y el rendimiento cuántico efectivo de PSII corregido para la fluorescencia de PSI Y(II)corr de Brassica napus .

• Tamaño efectivo de la antena del fotosistema I.

En una transición de oscuridad a luz, primero comienza a acumularse PC oxidado y solo con cierto retraso el P700 oxidado. La pendiente inicial de la señal de PC limpia ahora se puede utilizar como una medida para el tamaño efectivo de la antena del PS I. La segunda figura amplía los cambios iniciales de absorbancia y muestra la gran diferencia en la pendiente inicial de PC (rojo) y P700 (azul).

• El DUAL-KLAS-NIR

Tiene una ventana para visualizar los cambios simultáneos en los estados redox de P700 y PC entre sí. Esto permite una estimación de la constante de equilibrio aparente entre PC y P700. La figura muestra un ejemplo de un gráfico redox de P700 versus PC.

• Pulso de saturación

Durante un pulso de saturación aplicado a una hoja bien adaptada a la oscuridad, el conjunto de Fd se reduce y en un período posterior de oscuridad se vuelve a oxidar lentamente. Cuando el flujo de electrones en el lado aceptor del PSI se ha activado, la cinética de reoxidación se vuelve mucho más rápida. Después de la activación del lado aceptor del PSI, la inactivación en la oscuridad se puede seguir monitoreando la velocidad a la que el Fd se reoxida después de un pulso de sonda. Estas cinéticas se pueden ajustar con una rutina de ajuste exponencial. El Panel A ofrece ejemplos de la cinética de reoxidación del Fd ajustada con una rutina de ajuste exponencial y el Panel B muestra la cinética de inactivación en la oscuridad del lado aceptor del PSI para una hoja de Hedera helix .

• Cambios máximos de transmitancia

Los cambios máximos de transmitancia NIR de PC, P700 y Fd son proporcionales al contenido de estos compuestos en la hoja/muestra y las proporciones de los coeficientes de extinción de PC, P700 y Fd son constantes. Esto hace posible investigar las proporciones PC/P700 y Fd/P700 y, por lo tanto, los tamaños relativos de los depósitos de PC y Fd en diferentes especies o bajo diferentes condiciones (por ejemplo, sol/sombra, estrés/no estrés) de manera rutinaria con el DUAL-KLAS-NIR. Se observa que las proporciones altas de PC/P700 se correlacionan con valores altos de ETR. La figura ilustra que las hojas de sol y sombra de, en este caso, Hedera helix tienen contenidos de PC y Fd considerablemente diferentes en relación con P700.

Especificaciones para DUAL-KLAS-NIR

• Unidad de control y potencia DKN-C
  • Diseño general: Microcontrolador: 4 x AVR-RISC (8 MHz) + 4 MB SRAM; se pueden almacenar 256 000 puntos de datos con una resolución de 12 bits
  • Comunicación: Interfaz de PC: compatible con USB 1.1, 2.0 y 3.0
  • Interfaz de usuario: Computadora Windows (Windows 7/8/10) con software KLAS-100
  • Alimentación: Batería de plomo-ácido sellada recargable 12 V/2 Ah; Cargador de batería MINI-PAM/L (100 a 240 V CA)
  • Consumo de energía: Durante el funcionamiento básico 350 mA
  • Tomas: 6 puertos para cabezales (alimentación para luz de medición modulada de longitud de onda simple (2 canales) y longitud de onda doble (4 canales), alimentación para 2 matrices de LED actínicos (una en DKN-E y otra en DKN-D) y 1 matriz de LED de luz de medición NIR (en DKN-E), entrada para 2 detectores (el detector de fotodiodo de DKN-D está conectado al detector 1), toma para agitador (más controlador de velocidad e interruptor de espera), AUX (para sensor cuántico micro esférico US-SQS/WB o sensor cuántico mini con corrección de coseno US-MQS/WB), USB (para cable USB), TRIGGER OUT (salida de señales rectangulares de 5 V para activar dispositivos externos), 2 EXT. SIGNALS (entrada para señales CC externas. Rango 0-1 V o 0-5 V), y CHARGE (para cargador MINI-PAM/L).
  • Dimensiones: 36 cm x 16 cm x 26,5 cm (Ancho x Alto x Profundidad), con asa de transporte.
  • Peso: 5,8 kg
• Unidad emisora ​​DKN-E
  • Luz de medición: Matriz de LED Chip-On-Board para luz de medición NIR modulada por pulsos de 780, 820, 840, 870 y 965 nm, luz de medición de fluorescencia verde modulada por pulsos (540 nm).
  • Luz actínica: matriz de LED Chip-On-Board (635 nm) para iluminación actínica roja continua (máx. ~3400 µmol fotones m -2 s -1 PAR), que también se puede utilizar para destellos de un solo giro (máx. >28000 µmol fotones m -2 s -1 PAR, longitud 5-50 µs) y pulsos de giro múltiple (MT y SP) (máx. 25000 µmol fotones m -2 s -1 PAR, longitud 1-1000 ms).
  • Dimensiones: 5,5 cm x 9 cm x 4 cm (Ancho x Alto x Profundidad)
  • Peso: 560 g (incl. cables, 1,4 m de largo)
• Unidad detectora DKN-D
  • Luz de medición: luz de medición de fluorescencia azul modulada por pulsos (460 nm).
  • Luz actínica: luz azul (460 nm) para iluminación azul continua (máx. ~400 µmol m -2 s -1 PAR), matriz de LED Chip-On-Board (635 nm) para iluminación roja continua (máx. ~3400 µmol m -2 s -1 PAR), que también se puede utilizar para saturar destellos de un solo recambio (máx. >28000 µmol m -2 s -1 PAR, longitud 5-50 µs) y pulsos de recambio múltiples (MT y SP) (máx. 25000 µmol fotones m -2 s -1 PAR, longitud 1-1000 ms), luz roja lejana (740 nm) para iluminación roja lejana continua (máx. 400 µmol fotones m -2 s -1 ).
  • Detección de señales: Fotodiodo y preamplificador de pulsos para medir cuatro señales diferenciales de transmisión NIR de longitud de onda dual (780-820, 820-870, 870-965 y 840-965 nm) y dos señales de fluorescencia. La resolución temporal de una medición de un solo canal es de 35 µs, la de una medición de dos canales es de 150 µs y la de una medición de 6 canales es de 1 ms. Se utiliza el mismo detector (protegido por el mismo conjunto de filtros) para las mediciones de fluorescencia y transmisión NIR. El conjunto de filtros deja pasar longitudes de onda > 750 nm.
  • Dimensiones: 5,5 cm x 9 cm x 4 cm (Ancho x Alto x Profundidad)
  • Peso: 540 g (incluidos cables, 1,4 m de longitud)
• Caja de transporte DKN-T
  • Diseño: Caja de aluminio con embalaje de espuma personalizado para DUAL-KLAS-NIR y accesorios
  • Dimensiones: 60 cm x 40 cm x 34 cm (largo x ancho x alto)
  • Peso: 5 kg
• Sistema de posicionamiento lineal 3010-DUAL/B
  • Diseño: Consta de una placa base de aluminio anodizado negro con cremallera en la que se monta un soporte para cabezal de medición sobre una platina móvil que se puede colocar con precisión a lo largo de la cremallera mediante una perilla de ajuste lateral. Incluye una varilla de soporte de laboratorio de 13 cm, que se puede fijar (atornillar) a la parte inferior de la placa base, y una llave Allen de 3 mm
  • Dimensiones: 18,5 cm x 11,5 cm x 12 cm (largo x ancho x alto, máximo sin varilla de soporte de laboratorio)
  • Peso: 1050 g
• Cubeta de intercambio de gases DUAL-PAM-100 3010-DUAL
  • Diseño: Cubeta compuesta por un sándwich de dos marcos de aluminio de 2 x 2 cm, cada uno de los cuales sujeta la parte final de una varilla de metacrilato estándar Walz para conectar varios cabezales de medición del DUAL-KLAS-NIR. Material de sellado entre los marcos y la hoja: junta de espuma de silicona. Distancia entre la varilla de metacrilato y la hoja: aprox. 1 mm en cada lado de la hoja. Mitades de cubeta superior e inferior separadas neumáticamente, controladas por una unidad reguladora con tomas para conexiones de cables a la unidad de control 3000 C del GFS-3000. Área de la hoja examinada: 1,3 cm2 . Medición de la temperatura de la hoja: termopar, rango de -10 a +50 °C, precisión ±0,2 °C. Sensor microcuántico MQS/A con corrección de coseno externo para mediciones de PAR en un rango de 0 a 2500 µmol m -2 s -1 , precisión ±5%
  • Temperatura de funcionamiento: -5 a +45 °C
  • Dimensiones: Cubeta ensamblada: 10 cm x 4 cm x 12 cm (L x An x Al), caja electrónica: 7 cm x 7 cm x 15 cm (L x An x Al)
  • Peso: Cubeta, unidad reguladora, cables y marco de montaje: 1,7 kg; soporte de montaje ST-101: 2 kg
• Unidad óptica para suspensiones ED-101US/MD
  • Diseño: Cuerpo de aluminio anodizado negro con cubeta central de vidrio estándar de 10 x 10 mm; para la conexión de la unidad emisora ​​DKN-E, la unidad detectora DKN-D y el agitador magnético en miniatura PHYTO-MS; puertos adicionales para la conexión de dos unidades emisoras o detectoras adicionales.
  • Peso: 750 g
• Accesorios para ED-101US/MD
  • Bloque de control de temperatura ED-101US/T: Bloque seccionado con abertura central de 10 x 10 mm para montar en la parte superior de la unidad ED-101US/MD; para conectar a un baño de agua externo con flujo continuo (no incluido), peso 250 g
  • Agitador magnético en miniatura PHYTO-MS: Basado en el dispositivo fabricado por h+p (tipo Variomag-Mini); con adaptador para ser montado en el puerto inferior de la unidad óptica ED-101US/MD; alimentado y controlado por la unidad de potencia y control DKN-C
  • Sensor cuántico microesférico US-SQS/WB: esfera difusora de 3,7 mm ø acoplada a sensor PAR integrado mediante fibra de 2 mm de diámetro; unidad amplificadora compacta y soporte especial para montaje en unidad óptica ED-101US/MD; para conectar a la unidad de potencia y control DKN-C
• Unidad de potencia y control US-T/DR
  • Pantalla: Pantalla LCD de tres líneas
  • Rango de control: 0 °C a 50 °C en pasos de 0,1 K
  • Tensión de funcionamiento: 11 V – 14 V CC
  • Corriente máxima Peltier: 1 A
  • Tamaño: 105 mm x 90 mm x 130 mm (Ancho x Alto x Profundidad)
  • Peso: 0,57 kg
• Cabezal de transferencia de calor Peltier US-T/DS
  • Temperaturas alcanzables: 12 K por debajo de la temperatura ambiente, 15 K por encima de la temperatura ambiente (Cubeta de cuarzo colocada en la Unidad Óptica para Suspensiones ED-101US/MD con 1,5 mL de agua y agitador PHYTO-MS encendido)
  • Tamaño: ø 55 mm, 110 mm de altura
  • Longitud del cable: 130 cm
  • Peso: 0,29 kg (incluido cable)
• Adaptador de CA
  • Entrada: 100 V – 240 V CA, 1,5 A 50-60 Hz
  • Salida: 12 V CC, 5,5 A
  • Tamaño: 130 mm x 56 mm x 30 mm (largo x ancho x alto)
  • Peso: 0,50 kg (incluido cable)
• Cubeta para mediciones de absorbancia de baja deriva DUAL-K25
  • Diseño: Cubeta de vidrio de cuarzo, sección transversal: 10 mm x 10 mm, dimensiones externas: 12,5 mm x 12,5 mm x 26 mm (L x A x A). Soporte especial para cubetas para colocar la cubeta entre las unidades de detector y emisor DKN-D y DKN-E del DUAL-KLAS-NIR. Protectores de aluminio anodizado negro en forma de U para filtrar la luz externa. Tres juntas de sellado para proteger el cabezal de medición inferior de derrames.