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El MICROSCOPY-PAM es un fluorómetro de clorofila extremadamente sensible, diseñado para medir puntos microscópicos en muestras como preparaciones de tejido o suspensiones. Se basa en un microscopio de epifluorescencia modificado, equipado con un objetivo de gran apertura (20x Fluar) y fuentes de luz LED moduladas: azul de 470 nm para excitación y un LED rojo-naranja opcional de 625 nm. La fluorescencia de clorofila se detecta mediante un fotomultiplicador en un ocular especial, con diafragma iris y filtro dicroico que filtra la luz por encima de 650 nm, permitiendo mediciones precisas de fluorescencia modulada.
El sistema se controla mediante la unidad PAM-CONTROL, que permite operar el MICROSCOPY-PAM de forma independiente o conectarlo a un ordenador con Windows usando el software WinControl-3. Este software ofrece funciones avanzadas como análisis de pulsos de saturación, curvas de inducción y de luz, rutinas automatizadas y archivos batch para experimentos repetitivos. Permite calcular automáticamente parámetros clave de fluorescencia como F₀, Fm, F₀', Fm', Fv/Fm, qP, qL, qN, NPQ, Y(II), Y(NPQ), Y(NO) y ETR, y visualizar los datos en curvas de inducción y de luz. La versión anterior, WinControl-2, permite control en línea y análisis de pulsos de saturación, pero solo es compatible con Windows 7 de 32 bits.
El MICROSCOPY-PAM utiliza un microscopio de epifluorescencia Zeiss AxioScope 5 con objetivo 20x y LED azul (470 nm) para excitación de fluorescencia; un LED rojo-naranja (625 nm) es opcional. Los LEDs se pueden usar tanto para luz actínica como para pulsos de saturación mediante modulación especial.
La fluorescencia de clorofila se detecta con un fotomultiplicador en un ocular con diafragma y filtro dicroico (>650 nm). El sistema es controlado por la unidad PAM-CONTROL, que permite operación independiente o mediante PC con WinControl 2 o 3. Incluye adaptadores USB/RS-232, cargador MINI-PAM/L, cable para registrador gráfico y caja de transporte.
La unidad PAM-CONTROL realiza mediciones de fluorescencia PAM de forma independiente, pero también actúa como interfaz entre el fluorómetro y una computadora Windows que ejecute la versión 2 o 3 del software WinControl. La unidad PAM-CONTROL forma parte de varios sistemas PAM, todos ellos con un tubo fotomultiplicador de alta sensibilidad para la detección de fluorescencia: el MICROSCOPY-PAM, el MICROFIBER-PAM y el WATER-PAM FIBER Version.
En los tres sistemas, un procedimiento de apagado automático protege el tubo fotomultiplicador contra daños causados por altos niveles de fluorescencia o luz externa. La memoria de la unidad puede almacenar 4000 conjuntos de datos. Un amplio menú proporciona un control total de los ajustes del instrumento y una variedad de protocolos de medición.
El MICROSCOPY-PAM se opera mediante WinControl-3 en Windows, compatible con varios fluorómetros de Walz y la versión PAM-CONTROL, Permite:
Nota: WinControl-2 es una versión anterior, compatible solo con Windows 7 de 32 bits, que permite operación en línea y análisis de pulsos de saturación, con visualización de fluorescencia luz-oscuridad y recuperación de oscuridad.
| Componente / Función | Características clave |
|---|---|
| Software WinControl-3 | Controla MICROSCOPY-PAM y otros fluorómetros Walz; compatible con Windows XP–10. Permite experimentos automáticos y análisis de pulsos de saturación. |
| Visualización de datos | Curvas de inducción (Ft, NPQ, ETR) y curvas de luz (Y(II), Y(NPQ), Y(NO), ETR). |
| Análisis de pulsos | Cálculo automático de F₀, Fm, F₀', Fm', Fv/Fm, qP, qL, qN, NPQ, Y(II), Y(NPQ), Y(NO), ETR. |
| Exportación de datos | Formatos CSV y TXT. |
| Rutinas automatizadas | Pulsos de saturación, curvas de inducción y luz, corrección de desfase, calibración de sensor. |
| Protocolos personalizados | Archivos batch o macros para experimentos automáticos. |
| WinControl-2 | Versión anterior, solo Windows 7 32-bit, operación en línea, análisis de pulsos de saturación, visualización luz-oscuridad y recuperación. |