Sistema de medición de fluorescencia de clorofila DUAL-PAM-100

Suministros de laboratorio Kasalab le ofrece Sistema de medición de fluorescencia de clorofila DUAL-PAM-100 entre su amplia gama de equipos para laboratorio para la venta en Colombia.

Introducción

El sistema básico consta de un fluorómetro de clorofila PAM de alto rendimiento para analizar el fotosistema II y un espectrómetro de absorbancia de longitud de onda dual para analizar el fotosistema I. Se ha desarrollado una innovadora técnica de modulación de pulsos para medir estas dos señales simultáneamente y con una resolución temporal excepcionalmente alta.

En principio, el sistema mide una señal de un solo canal junto con una señal diferencial de dos canales. En el sistema básico, estas dos señales son la fluorescencia PAM del fotosistema II y el cambio de absorción del fotosistema I. El DUAL-PAM-100 no se limita a los análisis de los fotosistemas I y II. Por ejemplo, el accesorio “módulo emisor-detector P515/535” mide los cambios de dispersión como señal de absorción de un solo canal a 535 nm, y el desplazamiento de la banda electrocrómica de la energización de la membrana como señal de dos canales con 515 nm como muestra y 550 nm como longitud de onda de referencia.

Características distintivas del DUAL-PAM-100

• Luz actínica roja, azul y roja lejana. Destellos saturantes de rotación simple y múltiple.
• Todas las fuentes de luz se pueden conmutar con una resolución de tiempo de 2,5 μs mediante control de software.
• Método de pulso de saturación para el análisis del fotosistema I.
• Método de flujo de Klughammer para determinar el número de electrones que fluyen a través de un centro de reacción PSI por tiempo.
• Totalmente programable mediante archivos de script. Grabador de macros para una fácil programación de tablas de ejecución activadas.

Versión Modular DUAL-PAM-100

El sistema de medición DUAL-PAM está disponible en versión MODULAR (DUAL-PAM-100) y en versión FIBER (DUAL-PAM/F). La versión MODULAR tiene fuentes de luz y detección de señales ubicadas en cabezales de medición separados, la muestra se coloca entre los cabezales de medición y los cambios de absorción del fotosistema I se miden en el modo de transmisión. La versión FIBER tiene fuentes de luz y detección de señales en la unidad central, la muestra se coloca frente a la fibra óptica y los cambios de absorción del fotosistema I se miden en el modo de remisión.

Los cabezales de medición de la versión MODULAR se pueden intercambiar fácilmente. Mediante el uso de varios módulos accesorios, la VERSIÓN MODULAR puede medir el desplazamiento de la banda electrónica causado por la activación de la membrana, la fluorescencia de NADPH, la fluorescencia de colorantes sensibles al pH y la fluorescencia en dos bandas de onda diferentes. La versión FIBER carece de esta flexibilidad, pero puede resultar ventajosa cuando solo son de interés las actividades del fotosistema II y del fotosistema I.

Especificaciones de la versión MODULAR DUAL-PAM-100

• Unidad DUAL-C y accesorios:
  Unidad DUAL-C — microcontrol & almacenamiento: 2 × AVR-RISC (8 MHz), 4 MB SRAM; guarda 256.000 puntos a 12 bits.
  Conexión PC / software: USB 1.1–3.0; controla vía software DualPAM en Windows.
  Alimentación: batería recargable 12 V / 2 Ah + cargador MINI-PAM/L (100–240 V AC). Consumo básico ≈ 160 mA.
  Puertos y E/S: 6 puertos para cabezales de medición; salida para agitador; AUX (clips/sensores); USB; TRIGGER IN/OUT (5 V); 2 EXT. SIGNALS (0–1 V / 0–5 V); CHARGE.
  Dimensiones / peso unidad: 31 × 16 × 33,5 cm, 4,5 kg (con asa).
• Cabezales emisores / detectores:
  DUAL-E (P700, emisor NIR): medición P700 830/870 nm; luz actínica far-red 720 nm + COB 635 nm; PAR continuo hasta 3000 μmol m⁻² s⁻¹; pulsos saturantes single-turn hasta 200.000 μmol m⁻² s⁻¹ (5–50 μs). Tamaño ~10,5×5,5×7 cm, 400 g.
  DUAL-DB / DUAL-DR (detector fluorescencia): excitación 460 nm (DB) o 620 nm (DR); luz actínica azul hasta 1100 μmol m⁻² s⁻¹; detector fotodiodo PIN; resolución temporal ~30 μs; detecta >700 nm. Tamaño ~15×5,5×7 cm, 500 g.
  DUAL-EP515 / DUAL-DP515 (P515/535): emisores 520/550 nm (y 535 nm single); detector fotodiodo PIN, ventana 400–580 nm. Tamaño 15×5,5×7 cm, peso ≈ 400 g.
  DUAL-EAO / DUAL-DAO (Acridina Orange): emisor 455 nm; detector 500–580 nm; útil para gradientes de pH (dyes). Tamaño ≈ 10–15×5,5×7 cm, peso 400–500 g.
  DUAL-ENADPH / DUAL-DNADPH (NADPH): emisor 365 nm; detector PMT azul 420–550 nm (fotomultiplicador). Tamaño / peso: ~10–15 cm, 460–500 g.
  DUAL-DPD (detector fotodiodo): fotodiodo PIN, detecta >650 nm; portafiltros 30×30 mm. Peso ~350 g.
  DUAL-DPM (detector PMT): PMT Hamamatsu H6779, filtros >650 / >700 nm; carcasa aluminio. Peso ~490 g.
• Otros accesorios clave:
  Caja amplificadora PM-101/N: amplificación para detectores PM; selección de ganancia (6× con subdivisiones). Tamaño ~11×11×7 cm, 700 g.
  Unidad óptica ED-101US/MD: cubeta estándar 10×10 mm para suspensiones; admite agitador PHYTO-MS y varios cabezales; peso ≈ 750 g.
  Accesorios ED-101US/MD: bloque de temperatura (ED-101US/T), mini-agitador PHYTO-MS, sensor cuántico US-SQS/WB.
  Cubeta intercambio gases 3010-DUAL: área de hoja 1,3 cm², termopar (-10 a +50 °C, ±0,2 °C), sensor PAR hasta 2500 μmol m⁻² s⁻¹; dimensiones y peso especificados (cubeta + electrónica ≈ 1,7 kg).
  Cubeta DUAL-K25 (absorbancia baja deriva): cuvet de cuarzo 10×10 mm, protección contra luz externa.
  Fibras ópticas 2010-F: haz flexible con espiral de acero, 100 cm, diámetro activo 6 mm. Peso ~300 g.
  Caja de transporte Phyto-T: aluminio con espuma, 60×40×25 cm, 5 kg.
• Requisitos y condiciones:
  PC mínima: 1 puerto USB libre, ≥500 MB RAM, Windows XP–10 compatible.
  Temperatura operación (cubeta/hoja): cubeta de hoja soporta medición de -10 a +50 °C; cubetas y sensores diseñados para rango experimental habitual.

Versión FIBRA DUAL-PAM/F

La unidad de potencia y control de la versión FIBER, DUAL-PAM/F, contiene todas las fuentes de luz actínica y de medición, así como el detector de señal de fotodiodo. Se utilizan fibras ópticas para guiar la luz desde la unidad de potencia y control hasta la muestra y para dirigir la luz desde la muestra hacia atrás.

El DUAL-PAM/F está diseñado para evaluar las actividades de PS II midiendo la fluorescencia inducida por el rojo, y las actividades de PS I midiendo las intensidades de la luz reflejada a 830 y 870 nm. La versión de fibra óptica es necesaria cuando las muestras opacas no permiten mediciones de P700 en el modo de transmisión, pero también se utiliza en estudios de campo y para la detección de colecciones de plantas mutantes.

Especificaciones de la versión FIBER DUAL-PAM-100

• Unidad de potencia y control DUAL-PAM/F: La unidad integra dos microcontroladores AVR-RISC y 4 MB de SRAM, permitiendo almacenar hasta 256 000 puntos de datos a 12 bits. Emplea emisores dedicados para medición: P700 a 830/870 nm y fluorescencia a 620 nm. Ofrece luz actínica roja mediante LEDs COB (635 nm) y far-red (720 nm), con PAR continuo hasta 4000 μmol m⁻² s⁻¹ y destellos de saturación de hasta 200 000 μmol m⁻² s⁻¹. También incorpora luz azul actínica a 460 nm con PAR máximo de 500 μmol m⁻² s⁻¹.
• Fibras ópticas especiales 2010-F: Haz óptico flexible con espiral de acero recubierto en plástico y conector óptico de tres pines. Diámetro activo 6 mm, total 8 mm, longitud 100 cm, peso 300 g, diseñadas para transmisión estable de luz hacia el sitio de medición.
• Caja de transporte Phyto-T: Fabricada en aluminio, incluye espuma personalizada para el DUAL-PAM-100 y accesorios. Dimensiones 60 × 40 × 25 cm, peso 5 kg.
• Requisitos del computador: Un puerto USB libre, ≥500 MB RAM, y sistema Windows XP/Vista/7/8/10.
• Cubeta de suspensión KS-2500 y agitador MKS-2500: La cubeta es de acero inoxidable (7,5 mm × 9 mm), montada en cuerpo de PVC con puerto para jeringas Hamilton y conexiones para baño externo de flujo continuo. Incluye tres barras agitadoras magnéticas. El agitador MKS-2500 acciona la barra magnética e incorpora soporte para la fibra óptica y un adaptador que centra la cubeta.
• Porta hojas Arabidopsis DUAL-BA: Soporte compacto de POM con imán de neodimio, banda de acero elástico y guías que posicionan la hoja directamente frente a la punta de la fibra óptica. Incluye soporte adicional para orientar el haz óptico.

Medición simultánea de la fluorescencia de la clorofila en longitudes de onda cortas y largas

Se emplearon el soporte de cabezal de medición de 90 grados DUAL-H90 y filtros ópticos especiales para medir la fluorescencia de PAM simultáneamente en el rango espectral por debajo de 700 nm (sw) y por encima de 700 nm (lw). La configuración experimental mostró que la fluorescencia sw era más variable, lo que daba como resultado mayores rendimientos fotoquímicos de PSII en comparación con la fluorescencia lw. Los rendimientos fotoquímicos de PSII aparentemente más altos se pueden explicar por los bajos niveles de fluorescencia constante del fotosistema I en la ventana espectral sw. En el rango lw, los rendimientos fotoquímicos de PSII se subestiman debido a la mayor fluorescencia de fondo del fotosistema I.

	Registro simultáneo de la fluorescencia de longitud de onda corta (sw) y longitud de onda larga (lw) de una hoja (laurel cerezo, Prunus laurocerasus L.). Se formó una curva de luz, compuesta por 7 pasos de luz con intensidad creciente, seguida de un período de oscuridad.
	Registro simultáneo de la fluorescencia de longitud de onda corta (sw) y longitud de onda larga (lw) de una hoja (nogal común, Juglans regia L.). Cinética de fluorescencia rápida para la determinación de F(0), F(M). En el presente ejemplo, lwF (V)/F(M) = 0,837 y swF(V) /F(M) = 0,876.

Software del Dual-PAM-100

1. El software DualPAM gestiona mediciones complejas de fluorescencia y P700
• Permite mediciones simultáneas de doble canal (fluorescencia + P700), mostrando la interacción entre PSII y PSI.
• Calcula automáticamente parámetros clásicos y modernos, incluyendo efectos de transferencia de energía en PSII.
2. Permite análisis avanzados: pulsos de saturación, cinética rápida y curvas de luz
• Ejecuta análisis de pulso de saturación en PS I y PS II.
• Admite medición de cinética rápida (400 kHz), tanto en escala lineal como logarítmica.
• Produce curvas de luz para evaluar capacidad de transporte de electrones y limitaciones de los fotosistemas.
3. Manejo flexible de archivos, configuración y activación
• Permite crear y guardar una cantidad ilimitada de perfiles de configuración y activación (pulsos, iluminación, modos de medición).
• Las activaciones pueden programarse con una resolución extremadamente fina (2,5 µs).
Todas las configuraciones pueden reproducirse exactamente en experimentos futuros.
4. Gráficos y análisis avanzados en tiempo real
• Los rendimientos cuánticos Y(I) y Y(II) se grafican automáticamente uno contra el otro para evaluar el equilibrio entre fotosistemas.
• Permite identificar cambios dinámicos en PS I y PS II durante inducción luz-oscuridad.
• La señal P700 ofrece calidad equivalente a la fluorescencia, incluso en alta resolución temporal.
5. Sistema completo de registro e informes
• Guarda automáticamente todos los datos (cinética lenta, cinética rápida, saturaciones individuales).
• Permite exportar informes a Excel y añadir comentarios.
• Documenta todos los cambios de configuración, garantizando trazabilidad total.