Sistema de medición de fluorescencia de clorofila DUAL-PAM-100

Suministros de laboratorio Kasalab le ofrece Sistema de medición de fluorescencia de clorofila DUAL-PAM-100 entre su amplia gama de equipos para laboratorio para la venta en Colombia.

Introducción

El sistema básico consta de un fluorómetro de clorofila PAM de alto rendimiento para analizar el fotosistema II y un espectrómetro de absorbancia de longitud de onda dual para analizar el fotosistema I. Se ha desarrollado una innovadora técnica de modulación de pulsos para medir estas dos señales simultáneamente y con una resolución temporal excepcionalmente alta. En principio, el sistema mide una señal de un solo canal junto con una señal diferencial de dos canales. En el sistema básico, estas dos señales son la fluorescencia PAM del fotosistema II y el cambio de absorción del fotosistema I. El DUAL-PAM-100 no se limita a los análisis de los fotosistemas I y II. Por ejemplo, el accesorio “módulo emisor-detector P515/535” mide los cambios de dispersión como señal de absorción de un solo canal a 535 nm, y el desplazamiento de la banda electrocrómica de la energización de la membrana como señal de dos canales con 515 nm como muestra y 550 nm como longitud de onda de referencia.

Características distintivas del DUAL-PAM-100

• Luz actínica roja, azul y roja lejana. Destellos saturantes de rotación simple y múltiple.
• Todas las fuentes de luz se pueden conmutar con una resolución de tiempo de 2,5 μs mediante control de software.
• Método de pulso de saturación para el análisis del fotosistema I.
• Método de flujo de Klughammer para determinar el número de electrones que fluyen a través de un centro de reacción PSI por tiempo.
• Totalmente programable mediante archivos de script. Grabador de macros para una fácil programación de tablas de ejecución activadas.

Versión Modular DUAL-PAM-100

El sistema de medición DUAL-PAM está disponible en versión MODULAR (DUAL-PAM-100) y en versión FIBER (DUAL-PAM/F). La versión MODULAR tiene fuentes de luz y detección de señales ubicadas en cabezales de medición separados, la muestra se coloca entre los cabezales de medición y los cambios de absorción del fotosistema I se miden en el modo de transmisión. La versión FIBER tiene fuentes de luz y detección de señales en la unidad central, la muestra se coloca frente a la fibra óptica y los cambios de absorción del fotosistema I se miden en el modo de remisión. Los cabezales de medición de la versión MODULAR se pueden intercambiar fácilmente. Mediante el uso de varios módulos accesorios, la VERSIÓN MODULAR puede medir el desplazamiento de la banda electrónica causado por la activación de la membrana, la fluorescencia de NADPH, la fluorescencia de colorantes sensibles al pH y la fluorescencia en dos bandas de onda diferentes. La versión FIBER carece de esta flexibilidad, pero puede resultar ventajosa cuando solo son de interés las actividades del fotosistema II y del fotosistema I.

Posibles combinaciones de módulos emisores-detectores

Especificaciones de la versión MODULAR DUAL-PAM-100

• Unidad de potencia y control DUAL-C
  • Diseño general: 2 microcontroladores AVR-RISC (8 MHz) + 4 MB SRAM; se pueden almacenar 256 000 puntos de datos con una resolución de 12 bits
  • Interfaz de PC: compatible con USB 1.1, 2.0 y 3.0
  • Interfaz de usuario: Computadora Windows con software DualPAM
  • Alimentación: Batería de plomo-ácido sellada recargable 12 V/2 Ah; Cargador de batería MINI-PAM/L (100 a 240 V CA)
  • Consumo de energía: Durante el funcionamiento básico 160 mA
  • Tomas: 6 puertos para cabezales de medición (alimentación para luz de medición modulada de longitud de onda simple y doble, alimentación para 2 matrices de LED, entrada para 2 detectores), toma para agitador (más controlador de velocidad e interruptor de espera), AUX (para Leaf Clip 2030-B o sensor cuántico microesférico US-SQS/WB o sensor cuántico mini con corrección de coseno US-MQS/WB), USB (para cable USB), TRIGGER IN (entrada para señales rectangulares de 5 V para activar cinética rápida externamente), TRIGGER OUT (salida de señales rectangulares de 5 V para activar dispositivos externos), 2 EXT. SIGNALS (entrada para señales CC externas. Rango 0 - 1 V o 0 - 5 V) y CHARGE (para cargador MINI-PAM/L)
  • Dimensiones: 31 cm x 16 cm x 33,5 cm (Ancho x Alto x Profundidad), con asa de transporte
  • Peso: 4,5 kg
• Cabezal de medición con emisor NIR P700 DUAL-E
  • Luz de medición: emisor de longitud de onda dual P700. Longitud de onda de muestra 830 nm, longitud de onda de referencia 870 nm
  • Luz actínica: Lámpara LED de luz roja lejana: 720 nm. Matriz LED de chip a bordo (COB): 635 nm para iluminación actínica continua, PAR máximo de 3000 μmol m -2 s -1 . Destellos de saturación de un solo giro, PAR máximo de 200 000 μmol m -2 s -1 , ajustable entre 5 y 50 μs. Destellos de múltiples giros, PAR máximo de 30 000 μmol m -2 s -1 , ajustable entre 1 y 1000 ms
  • Dimensiones: 10,5 cm x 5,5 cm x 7 cm (largo x ancho x alto)
  • Peso: 400 g (incl. cables de 1 m de longitud)
• Cabezal de medición con detector, DUAL-DB (azul) o DUAL-DR (rojo)
  • Luz de medición de fluorescencia: 460 nm (DUAL-DB) o 620 nm (DUAL-DR)
  • Luz actínica: Lámpara LED azul (460 nm) para iluminación actínica continua, PAR máximo 1100 μmol m -2 s -1 . Matriz de LED en chip-on-board idéntica a la del cabezal de medición DUAL-E
  • Detección de señal: fotodiodo PIN con preamplificador de pulsos especial para medir P700 y cambios de fluorescencia con una resolución temporal máxima de 30 μs. La fluorescencia se detecta en longitudes de onda superiores a 700 nm.
  • Dimensiones: 15 cm x 5,5 cm x 7 cm (largo x ancho x alto)
  • Peso: 500 g (incluidos cables de 1 m de longitud)
• Caja de transporte
  • Diseño: Caja de aluminio con embalaje de espuma personalizado para DUAL-PAM-100 y accesorios
  • Dimensiones: 60 cm x 40 cm x 25 cm (largo x ancho x alto)
  • Peso: 5 kg
• Requisitos de la computadora
  • 1 puerto USB libre; 500 o más MB de RAM; sistema operativo: Microsoft Windows XP/Vista/7/8/10
• Cabezal emisor P515/535 DUAL-EP515
  • Luz de medición: par de longitudes de onda duales de 520 y 550 nm, longitud de onda única de 535 nm
  • Luz actínica: Idéntica a la del cabezal de medición DUAL-E
  • Dimensiones: 15 cm x 5,5 cm x 7 cm (largo x ancho x alto)
  • Peso: 400 g (incl. cable de 1 m de largo)
• Cabezal detector P515/535 DUAL-DP515
  • Detección de señal: Fotodiodo PIN con preamplificador de pulsos especial. Ventana de detección, 400 nm – 580 nm
  • Dimensiones: 15 cm x 5,5 cm x 7 cm (largo x ancho x alto)
  • Peso: 400 g (incl. cable de 1 m de largo)
• Cabezal emisor de naranja de acridina DUAL-EAO
  • Luz de medición AO: 455 nm
  • Dimensiones: 10,5 cm x 5,5 cm x 7 cm (largo x ancho x alto)
  • Peso: 400 g (incl. cables de 1 m de longitud)
• Cabezal detector de naranja de acridina DUAL-DAO
  • Detección de señal: Fotodiodo PIN con preamplificador de pulsos especial. Ventana de detección, 500 nm – 580 nm
  • Medición de la fluorescencia de clorofila mediante luz: excitación modulada a 620 nm
  • Luz actínica: Lámpara LED azul (460 nm) para iluminación actínica continua, PAR máximo 700 μmol m -2 s -1 . Matriz LED en chip-on-board idéntica a la del cabezal de medición DUAL-E
  • Dimensiones: 15 cm x 5,5 cm x 7 cm (largo x ancho x alto)
  • Peso: 500 g (incl. cable de 1 m de largo)
• Cabezal emisor DUAL-ENADPH
  • Luz de medición de NADPH: 365 nm
  • Medición de fluorescencia de clorofila con luz: excitación modulada 620 nm
  • Luz actínica: Lámpara LED de luz roja lejana: 740 nm. Matriz de LED en chip integrado idéntica a la de DUAL-E
  • Dimensiones: 15 cm x 5,5 cm x 7 cm (largo x ancho x alto)
  • Peso: 500 g
• Cabezal detector DUAL-DNADPH
  • Detección de señal: Fotomultiplicador sensible al azul con filtro sándwich que transmite desde 420-550 nm
  • Dimensiones: 10 cm x 6,5 cm x 10,5 cm (largo x ancho x alto)
  • Peso: 460 g (incl. cable de 1 m de largo)
• Detector de fotodiodos DUAL-DPD
  • Detección de señal: fotodiodo PIN con preamplificador de pulsos especial. La fluorescencia se detecta en longitudes de onda superiores a 650 nm.
  • Portafiltros: Para filtros ópticos (estándar 30 x 30 mm), hasta 15 mm de espesor
  • Dimensiones: 9,7 cm x 7,1 cm x 7,8 cm (largo x ancho x alto)
  • Peso: 350 g
• Detector fotomultiplicador DUAL-DPM
  • Detección de señal: tubo fotomultiplicador de 8 mm de diámetro con fuente de alimentación de alto voltaje montado en una carcasa compacta de aluminio (Hamamatsu H6779). Se proporcionan dos filtros para la detección de fluorescencia en longitudes de onda > 650 nm o > 700 nm
  • Portafiltros: Con tapa. Para filtros ópticos (estándar 30 x 30 mm), de hasta 15 mm de espesor.
  • Dimensiones: 100 mm x 66 mm x 108 mm (largo x ancho x alto)
  • Peso: 490 g (incl. cable de 1,5 m de largo)
  • Caja amplificadora PM-101/N
  • Incluido en el alcance de suministro de la unidad detectora fotomultiplicadora NADPH/9-AA o detector fotomultiplicador DUAL-DPM
  • Diseño: Chasis de aluminio con pintura texturizada. Entrada de línea 115/230 V CA, 50-60 Hz, 0,04/0,02 A. Dos botones giratorios permiten la selección de 6 factores de amplificación gruesos con 11 subdivisiones.
  • Dimensiones: 11 cm x 11 cm x 7 cm (largo x ancho x alto)
  • Peso: 700 g
• Unidad óptica para suspensiones ED-101US/MD
  • Diseño: Cuerpo de aluminio anodizado negro con cubeta central de vidrio estándar de 10 x 10 mm; para la conexión de cabezales de medición DUAL-DB (o DUAL-DR) y DUAL-E y agitador magnético en miniatura PHYTO-MS; puertos adicionales para la conexión de dos cabezales de medición adicionales (por ejemplo, naranja de acridina y fluorescencia NADPH)
  • Peso: 750 g
  • Accesorios para ED-101US/MD
  • Bloque de control de temperatura ED-101US/T: Bloque seccionado con abertura central de 10 x 10 mm para montar en la parte superior de la unidad ED-101US/MD; para conectar a un baño de agua externo con flujo continuo (no incluido), peso: 250 g
  • Agitador magnético en miniatura PHYTO-MS: Basado en el dispositivo fabricado por h+p (tipo Variomag-Mini); con adaptador para ser montado en el puerto inferior de la unidad óptica ED-101US/MD; alimentado y controlado por la unidad de control y potencia DUAL-C
  • Sensor cuántico microesférico US-SQS/WB: esfera difusora de 3,7 mm Ø acoplada a sensor PAR integrado mediante fibra de 2 mm de diámetro; unidad amplificadora compacta y soporte especial para montaje en unidad óptica ED-101US/MD; para conectar a la unidad de control y potencia DUAL-C
• Cubeta de intercambio de gases DUAL-PAM-100 3010-DUAL
  • Diseño: Cubeta compuesta por un sándwich de dos marcos de aluminio de 2 x 2 cm, cada uno de los cuales sujeta la parte final de una varilla de metacrilato estándar Walz para conectar varios cabezales de medición del DUAL-PAM-100. Material de sellado entre los marcos y la hoja: junta de espuma de silicona. Distancia entre la varilla de metacrilato y la hoja: aprox. 1 mm en cada lado de la hoja.
  • Mitades de cubeta superior e inferior separadas neumáticamente, controladas por una unidad reguladora con enchufes para conexiones de cables a la unidad de control 3000 C del GFS-3000. Área de la hoja examinada: 1,3 cm 2 . Medición de la temperatura de la hoja: termopar, rango de -10 a +50 °C, precisión ±0,2 °C. Sensor microcuántico MQS/A con corrección de coseno externo para mediciones de PAR en un rango de 0 a 2500 μmol m -2 s -1 , precisión ±5 %
  • Temperatura de funcionamiento: -5 a +45 °C
  • Dimensiones: Cubeta ensamblada: 10 cm x 4 cm x 12 cm (L x An x Al), caja electrónica: 7 cm x 7 cm x 15 cm (L x An x Al)
  • Peso: Cubeta, unidad reguladora, cables y marco de montaje: 1,7 kg; soporte de montaje ST-101: 2 kg
• Cubeta para mediciones de absorbancia de baja deriva DUAL-K25
  • Diseño: Cubeta de vidrio de cuarzo, sección transversal: 10 mm x 10 mm, dimensiones externas: 12,5 mm x 12,5 mm x 26 mm (L x A x A). Soporte especial para cubetas para colocar la cubeta entre dos cabezales de medición. Protectores de aluminio anodizado negro en forma de U para filtrar la luz externa. Tres juntas de sellado para proteger el cabezal de medición inferior contra derrames

Versión FIBRA DUAL-PAM/F

La unidad de potencia y control de la versión FIBER, DUAL-PAM/F, contiene todas las fuentes de luz actínica y de medición, así como el detector de señal de fotodiodo. Se utilizan fibras ópticas para guiar la luz desde la unidad de potencia y control hasta la muestra y para dirigir la luz desde la muestra hacia atrás.

El DUAL-PAM/F está diseñado para evaluar las actividades de PS II midiendo la fluorescencia inducida por el rojo, y las actividades de PS I midiendo las intensidades de la luz reflejada a 830 y 870 nm. La versión de fibra óptica es necesaria cuando las muestras opacas no permiten mediciones de P700 en el modo de transmisión, pero también se utiliza en estudios de campo y para la detección de colecciones de plantas mutantes.

	Vista frontal de la versión FIBRA del DUAL-PAM-100 (DUAL-PAM/F).
	Accesorios para DUAL-PAM/F. De izquierda a derecha: Portahojas del accesorio DUAL-BA, adaptador de fibra óptica DUAL-A, clip de hojas DUAL-LC y clip de hojas 2030-B.

Especificaciones de la versión FIBER DUAL-PAM-100

• Unidad de potencia y control DUAL-PAM/F
  • Diseño general: Microcontrolador: 2 x AVR-RISC (8 MHz) + 4 MB SRAM; se pueden almacenar 256 000 puntos de datos con una resolución de 12 bits
  • Luz de medición: emisor de longitud de onda dual P700: longitud de onda de muestra 830 nm, longitud de onda de referencia 870 nm. Emisor de fluorescencia: 620 nm
  • Luz roja actínica: Lámpara LED de luz roja lejana: 720 nm. Matriz de LED chip-on-board (COB): 635 nm para iluminación actínica continua, PAR máximo de 4000 μmol m -2 s -1 . Destellos de saturación de un solo giro, PAR máximo de 200 000 μmol m -2 s -1 , ajustable entre 5 y 50 μs. Destellos de múltiples giros, PAR máximo de 20 000 μmol m -2 s -1 , ajustable entre 1 y 1000 ms.
  • Luz azul actínica: Lámpara LED azul: 460 nm para iluminación actínica continua, máximo 500
  • μmol m -2 s -1 PAR.
  • Detección de señal: fotodiodo PIN con preamplificador de pulso especial para medir P700 y cambios de fluorescencia con una resolución temporal máxima de 10 μs
  • Comunicación: Interfaz de PC: compatible con USB 1.1, 2.0 y 3.0
  • Interfaz de usuario: Computadora Windows con software DualPAM
  • Alimentación: Batería de plomo-ácido sellada recargable 12 V/2 Ah; Cargador de batería MINIPAM/L (100 a 240 V CA)
  • Consumo de energía: Durante el funcionamiento básico 160 mA
  • Tomas: AUX (para Leaf Clip 2030-B o sensor cuántico mini con corrección de coseno US-MQS/WB), USB (para cable USB), TRIGGER IN (entrada para señales rectangulares de 5 V para activar cinética rápida externamente), TRIGGER OUT (salida de señales rectangulares de 5 V para activar dispositivos externos), 2 EXT. SIGNALS (entrada para señales CC externas. Rango 0 - 1 V o 0 - 5 V) y CHARGE (para cargador MINI-PAM/L).
  • Dimensiones: 31 cm x 16 cm x 33,5 cm (Ancho x Alto x Profundidad), con asa de transporte
  • Peso: 4,5 kg
• Fibras ópticas especiales 2010-F
  • Diseño: Haz flexible, en espiral de acero, recubierto de plástico con conector óptico de tres pines
  • Extremo de la junta (sitio de medición): diámetro activo 6 mm, diámetro exterior 8 mm
  • Longitud: 100 cm
  • Peso: 300 g
• Caja de transporte Phyto-T
  • Diseño: Caja de aluminio con embalaje de espuma personalizado para DUAL-PAM-100 y accesorios
  • Dimensiones: 60 cm x 40 cm x 25 cm (largo x ancho x alto)
  • Peso: 5 kg
• Requisitos de la computadora
  • 1 puerto USB libre; 500 o más MB de RAM; sistema operativo: Microsoft Windows XP/Vista/7/8/10
• Cubeta de suspensión KS-2500 y agitador MKS-2500
  • Cubeta: Cubeta redonda de acero inoxidable (7,5 mm de ancho, 9,0 mm de profundidad) con adaptador de ventana superior para conectar la fibra óptica; incrustada en un cuerpo de PVC con puerto de inyección para jeringas Hamilton y boquillas de manguera para conectar un baño de agua externo de flujo continuo (no incluido). Incluye tres barras agitadoras magnéticas de 6,0 x 1,5 mm
  • Agitador magnético: Para accionar la barra agitadora magnética en la cubeta de suspensión KS-2500; con anillo de PVC para centrar la cubeta y soporte en miniatura para fijar la fibra óptica en la parte superior de la cubeta
• Porta hojas Arabidopsis DUAL-BA
  • Diseño: Porta-puntas de fibra en forma de tubo compuesto de polioximetileno (POM; 4,5 cm x 2,5 cm, L x P máx.) con imán de neodimio permanente empotrado. Banda de acero elástico (0,3 mm de grosor, 1,5 cm de ancho) que consta de dos brazos (2 cm y 5 cm, respectivamente) que forman un ángulo recto. La hoja se coloca entre el brazo de 2 cm y la punta de fibra óptica. El brazo de 5 cm está unido al porta-puntas de fibra mediante el imán. El brazo de 5 cm se desliza por una guía de ranura. Incluye un soporte con guía de fibra óptica

Solicitudes de DUAL-PAM-100

Varios artículos en nuestra revista de Internet (PAM Application News, PAN) informan sobre la amplia gama de aplicaciones del sistema de medición DUAL-PAM-100 y aspectos importantes de los análisis de pulsos de saturación de PS I y PS II.

Medición simultánea de la fluorescencia de la clorofila en longitudes de onda cortas y largas

Se emplearon el soporte de cabezal de medición de 90 grados DUAL-H90 y filtros ópticos especiales para medir la fluorescencia de PAM simultáneamente en el rango espectral por debajo de 700 nm (sw) y por encima de 700 nm (lw). La configuración experimental mostró que la fluorescencia sw era más variable, lo que daba como resultado mayores rendimientos fotoquímicos de PSII en comparación con la fluorescencia lw. Los rendimientos fotoquímicos de PSII aparentemente más altos se pueden explicar por los bajos niveles de fluorescencia constante del fotosistema I en la ventana espectral sw. En el rango lw, los rendimientos fotoquímicos de PSII se subestiman debido a la mayor fluorescencia de fondo del fotosistema I.

	Registro simultáneo de la fluorescencia de longitud de onda corta (sw) y longitud de onda larga (lw) de una hoja (laurel cerezo, Prunus laurocerasus L.). Se formó una curva de luz, compuesta por 7 pasos de luz con intensidad creciente, seguida de un período de oscuridad.
	Registro simultáneo de la fluorescencia de longitud de onda corta (sw) y longitud de onda larga (lw) de una hoja (nogal común, Juglans regia L.). Cinética de fluorescencia rápida para la determinación de F(0), F(M). En el presente ejemplo, lwF (V)/F(M) = 0,837 y swF(V) /F(M) = 0,876.

-PAN (2009) 2: 1 - 13 – Determinación de NADPH

Nuevo módulo NADPH/9-AA para el DUAL-PAM-100: Descripción, funcionamiento y ejemplos de aplicación. Por Ulrich Schreiber y Christof Klughammer. El módulo NADPH/9-AA es un nuevo accesorio del sistema DUAL-PAM-100 que excita la fluorescencia a 365 nm y detecta la fluorescencia en el rango de 420 a 580 nm. El nuevo módulo permite medir los cambios inducidos por la luz de la fluorescencia de NADPH en suspensiones de cloroplastos aislados, algas y cianobacterias. Se describen las características técnicas del módulo y se presentan ejemplos de aplicación. También se presentan mediciones simultáneas de la fluorescencia de clorofila (Chl) y NADPH. Se demuestra que los pulsos de saturación pueden servir para estimar el grado de reducción de NADP en el estado estacionario.

-PAN (2008) 1: 27 - 35 – Parámetros de rendimiento del PSII

Rendimientos cuánticos complementarios de PS II calculados a partir de parámetros de fluorescencia simples medidos mediante fluorometría PAM y el método de pulso de saturación.
Por Christof Klughammer y Ulrich Schreiber. El destino de la energía de excitación en PS II se describe de forma exhaustiva mediante los rendimientos cuánticos complementarios Y(II) + Y(NPQ) + Y(NO) = 1. Se demuestra que las expresiones simples para Y(NO) e Y(NPQ) propuestas por Genty et al. (1996), que no contienen Fo', son totalmente equivalentes a las expresiones mucho más complejas de Kramer et al. (2004) y son válidas tanto para los modelos de lago como de charco. Se analiza el significado práctico de los rendimientos cuánticos complementarios.

-PAN (2008) 1: 21 - 24 – Mutante Chl b

Monitoreo de los efectos de la reducción del tamaño de la antena PS II en los rendimientos cuánticos de los fotosistemas I y II utilizando el sistema de medición DUAL-PAM-100. Por Erhard Pfündel, Christof Klughammer y Ulrich Schreiber. Se utiliza el DUAL-PAM-100 para analizar hojas de cebada sin Chl b (Hordeum vulgare cv. Donaria mutante chlorina-f2 2800) y las hojas de tipo silvestre correspondientes. Los resultados muestran que el pequeño tamaño de la antena PS II en el mutante afecta tanto a la fotoquímica de PS I como a la de PS II.

-PAN (2008) 1: 15 - 18 – Estrés por calor

Extinción no fotoquímica de la fluorescencia y rendimientos cuánticos en PS II y PS I: análisis de las limitaciones inducidas por el calor utilizando Maxi-Imaging-PAM y DUAL-PAM-100. Por Ulrich Schreiber y Christof Klughammer. En este artículo se demuestra el gran potencial de las mediciones combinadas con la versión Maxi del Imaging-PAM y el DUAL-PAM-100.

-PAN (2008) 1: 11 - 14 – Parámetros de rendimiento PSI

Método de pulso de saturación para la evaluación de la conversión de energía en PS I. Por Christof Klughammer y Ulrich Schreiber. El artículo resume los antecedentes teóricos del método de pulso de saturación que utiliza el instrumento DUAL-PAM-100 para determinar los rendimientos cuánticos de la conversión de energía fotoquímica y la disipación de energía no fotoquímica en PS I.

-PAN (2008) 1: 1 - 10 – Potencial de membrana

Nuevo accesorio para el DUAL-PAM-100: el módulo P515/535 y ejemplos de su aplicación. Por Ulrich Schreiber y Christof Klughammer. Se describen las características técnicas del módulo P515/535 y se presentan algunos ejemplos típicos de aplicación. El dispositivo proporciona información sobre el potencial de membrana, la energización de la membrana ("dispersión") y el gradiente de protones, así como sobre los flujos de protones y electrones.